一、技术方案
1. 产品概述
BEL7402DDP人肝癌顺铂耐药细胞是由金年会金字招牌诚信至上的上海淳麦生物科技有限公司提供的实验用细胞系。该细胞系经过对BEL7402人肝癌细胞进行顺铂(DDP)长时间的诱导培养,筛选出了具有稳定顺铂耐药性的细胞株。这种细胞株广泛应用于研究肝癌耐药机制、筛选抗癌药物、及开发肿瘤治疗策略。2. 技术优势
- 高耐药性:BEL7402DDP细胞经过长期顺铂诱导,表现出稳定的耐药性,非常适合于耐药机制研究。
- 高重现性:细胞株在多次传代后保持性状稳定,实验结果具备良好的重现性。
- 广泛应用:此细胞系适用于多种实验场景,包括药物筛选、基因表达分析及信号通路研究。
二、实验案例
1. 实验目的
本实验旨在通过使用BEL7402DDP细胞,研究新型抗癌药物对顺铂耐药肝癌细胞的抑制作用,并探索其可能诱导的分子机制。2. 实验方法
- 细胞培养: 将BEL7402DDP细胞在含有10%胎牛血清的RPMI-1640培养基中培养,置于37℃、5% CO2的培养箱中。
- 药物处理: 将细胞分成对照组和实验组,实验组添加不同浓度的新型抗癌药物,对照组加入等量DMSO。
- 细胞活力检测: 采用CCK-8法检测细胞活力,计算药物的抑制率。
- 流式细胞术: 检测细胞凋亡率,分析药物对细胞凋亡的影响。
- Western Blot分析: 提取细胞总蛋白,检测相关信号通路蛋白(如PI3K/AKT、MAPK等)的表达变化。
3. 实验结果
- 药物抑制率: 实验数据显示,新型抗癌药物在5μM浓度下对BEL7402DDP细胞的抑制率达到65%,显著高于对照组(P<0.01)。
- 细胞凋亡率: 流式细胞术结果显示,药物处理后BEL7402DDP细胞的凋亡率显著增加(P<0.05)。
- 蛋白表达变化: Western Blot结果显示,药物处理后BEL7402DDP细胞中PI3K/AKT信号通路相关蛋白的表达显著下调,表明该药物可能通过抑制PI3K/AKT通路发挥抗肿瘤作用。